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一种基于磁珠法的快速、不加热的核酸提取试剂盒
本发明提供了一种基于磁珠法的快速、不加热的核酸提取试剂盒,含有磁珠的溶液,蛋白酶K;polyA溶液;去蛋白液;洗涤液液;洗脱液;裂解液。本发明还提供了采用上述的试剂盒对核酸进行提取的方法,先加入裂解液和磁珠到样品中,充分震荡混匀,在裂解细胞释放核酸的同时用磁珠捕获核酸,然后分别采用特有的去蛋白液和漂洗液洗涤去除磁珠表面的蛋白质和盐离子等杂质,最后用特有的洗脱液在室温快速洗脱核酸。与常规的磁珠法核酸提取试剂盒相比,本发明的试剂盒步骤简便、快速,整个流程下来仅需要15min左右,而且不需要加热,降低了可能因为气溶胶造成样品间污染的概率;无氯仿苯酚等有毒试剂,安全无污染。
2019.01.21
一种基于磁珠法的无醇病毒核酸提取试剂盒
本发明提供了一种基于磁珠法的无醇病毒核酸提取试剂盒,含有裂解液;磁珠溶液;蛋白酶K;polyA溶液;去蛋白液;洗涤液;缓冲液。本发明还提供了采用上述的试剂盒提取核酸的方法,先加入样本、裂解液和磁珠进行混匀,然后边裂解边捕获核酸分子,最后分别采用特有的无醇去蛋白液和洗涤液洗涤去除磁珠表面的蛋白质和盐离子等杂质。与常规的病毒核酸提取方法相比较,操作步骤简单,不需要单独加入结合液,实现了裂解和结合同时进行,DNA和RNA共提;整个操作过程中不加入乙醇或异丙醇,抑制物质残留少,实验步骤简便,整个流程下来仅需要40min左右;安全无污染,无氯仿苯酚等有毒试剂,既可以手工操作也可以用于自动化平台。
2019.01.21
一种兜兰DNA提取缓冲液及其配制方法和使用方法
本发明提供了一种兜兰DNA提取缓冲液及其配制方法和使用方法,属于基因工程技术领域,所述兜兰DNA提取缓冲液以水为溶剂,每升包括:150~250mL Tris‑HCl溶液、10~20g氯化钠、80~120mL EDTA溶液和5~15mLβ‑巯基乙醇。采用本发明提供的兜兰DNA提取缓冲液能够去除样品中的色素和多糖物质,得到质量较好的DNA,进而能够在凝胶成像时,使主带明显,而没有添加兜兰DNA提取缓冲液提取的DNA,在凝胶成像时,主带不明显。
2019.01.18
参与调控链霉菌中ACT产量的细胞被合成基因
本申请属于微生物发酵工程技术领域,具体涉及链霉菌中与聚酮类化合物放线紫红素(ACT)产量相关的基因。本申请具体涉及细胞被合成基因在链霉菌ACT产量调控方面的应用,所述细胞被合成基因共7个;包括:
SCO1525
、
SCO2097
、
SCO2132
、
SCO3150
、
SCO4440
、
SCO4878
、
SCO5174
;该类基因突变后,对链霉菌ACT产量具有调控影响。发明人对天蓝色链霉菌M145进行了诱变,对放线紫红素产量变化的菌株进行了筛选。对筛选出的阳性克隆子通过酶切、自连和测序定位出转座子在基因组上的位置,并以多次筛选定位同一基因的原则排除自发突变基因,最终确定影响放线紫红素产量的基因。
2019.01.16
一种可变剪接报告载体及其制备方法
本发明公开了一种可变剪接报告载体,在报告基因表达载体pEGFP‑C1的报告基因序列内插入两段内含子序列intron1和intron2,intron1与intron2分别具有5’剪切位点,分支位点和3’剪切位点。并且公开了可变剪接报告载体的制备方法。根据RNA的剪接机制设计合成intron1和intron2,将intron1和intron2分别插入插入报告基因表达载体的报告序列,用以在细胞水平和活体水平检测可变剪接事件,含有剪接位点的内含子的插入便于转录后mRNA的正确拼接。
2019.01.04
鸭瘟病毒gE和gI双基因无痕缺失株CHv-BAC-G-ΔgE+ΔgI及其构建方法
本发明提供了一种鸭瘟病毒gE和gI双基因无痕缺失株CHv‑BAC‑G‑ΔgE+ΔgI及其构建方法。本发明利用GS1783大肠杆菌菌株及pEPkan‑S质粒,在细菌人工染色体重组鸭瘟病毒拯救系统平台上经两次同源重组缺失鸭瘟病毒gE基因和gI基因,首次完成了无外源碱基残留的鸭瘟病毒双基因无痕缺失株的构建。本发明技术方案解决了缺失鸭瘟病毒基因时在缺失位点残留碱基的问题,为准确探究鸭瘟病毒基因功能及减毒活疫苗的构建提供了充分的技术支持。
2018.12.26
一种猪繁殖与呼吸综合症病毒重组质粒及其构建方法
本发明属于猪繁殖与呼吸综合症技术领域,具体公开一种猪繁殖与呼吸综合症病毒重组质粒及其构建方法。所述重组质粒为pZJ‑GP5‑2A‑M、pZJ‑GP5‑2A‑M‑2A‑IL‑18、pZJ‑GP5m、pZJ‑GP5m‑2A‑IL‑18或pZJ‑IL‑18,其中GP5m是指修饰型GP5。免疫兔子初步证实本发明构建的重组质粒可正确表达具有免疫原性的蛋白,可以有效诱导机体产生抗PRRSV特异性体液免疫和黏膜免疫反应。
2018.12.26
鸭瘟病毒US1基因无痕缺失病毒株及其构建方法
本发明提供了一种鸭瘟病毒US1基因无痕缺失病毒株及其构建方法。本发明利用GS1783大肠杆菌菌株及pEPkan‑S质粒,在细菌人工染色体重组鸭瘟病毒拯救系统平台上经两次同源重组分别缺失鸭瘟病毒US1单、双拷贝基因,首次完成了该基因的无痕缺失病毒株构建,并探究了该基因对病毒复制的影响。本发明技术方案为准确探究鸭瘟病毒US1基因功能奠定了基础,以期对鸭瘟病毒分子生物学研究提供参考。
2018.12.26
鸭瘟病毒gI基因无痕缺失株CHv-BAC-G-ΔgI及其构建方法
本发明提供了一种鸭瘟病毒gI基因无痕缺失株CHv‑BAC‑G‑ΔgI及其构建方法。本发明利用GS1783大肠杆菌及pEPkan‑S质粒,在细菌人工染色体重组鸭瘟病毒拯救系统平台上经同源重组缺失鸭瘟病毒gI基因,首次完成了无外源碱基残留的鸭瘟病毒gI基因无痕缺失株的构建。本发明技术方案解决了缺失鸭瘟病毒基因时在缺失位点残留碱基的问题,为准确探究鸭瘟病毒基因功能及减毒活疫苗的构建提供了充分的技术支持。
2018.12.26
一种粪便保存液及其制备方法和应用
本发明涉及粪便微生物检测领域,具体而言,涉及一种粪便保存液及其制备方法和应用。一种粪便保存液,所述粪便保存液的溶剂为水,以所述粪便保存液的体积计,各组分的浓度如下:乙二胺四乙酸9‑13g/L,异硫氰酸胍400‑600g/L,1M Tris‑HCl(pH=7‑10)体积百分数为8%‑10%,氯化钠7‑10g/L,山梨醇50‑80g/L,十二烷基硫酸钠20‑40g/L。该粪便保存液实现了粪便样本的常温保存以及随时随地的采集粪便样本,并且提高了每个菌属微生物DNA的稳定性以及保存时间,而且便于长途运输。
2018.12.14
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