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一种赖氨酸修饰的二氧化硅粒子制备及提取DNA方法
本发明专利公布了一种赖氨酸修饰的二氧化硅粒子制备及提取DNA方法,所需材料及试剂包括:二氧化硅粒子、去离子水、乙醇、氨水、氢氧化钠、醋酸、正硅酸乙酯、γ‑丙基三甲氧基硅烷、缓冲溶液,所需设备包括:三颈瓶、离心管、离心机、水浴箱、透射电镜、真空干燥箱、pH计。本发明采用Stober来制备二氧化硅粒子,避免了以往方法导致的氨基、羧基比例难以调节的弊端,针对不同DNA,选择合适的pH环境进行吸附和脱附,各项材料可提前预制且便于保存,材料廉价,提供一种耗时较少、操作简便、成本更低、精度更高的赖氨酸修饰的二氧化硅粒子制备及提取DNA方法。
2018.09.29
一种磁珠法提取DNA的试剂盒及提取方法
本发明专利公布了一种磁珠法提取DNA的试剂盒及提取方法,试剂盒包括消化裂解体系、结合体系、漂洗体系、洗脱体系四大体系。试剂盒提取方法包括:样品匀浆、细胞裂解、离心、DNA与磁珠结合、洗涤、DNA洗脱。本发明益处在于:(1)避免了复杂的液体处理过程,将整体的操作时间缩短了20min以上,使提取过程更为快捷;(2)磁珠转移过程中无液体残留,洗脱效率和PCR反应的成功率更高;(3)操作过程中,磁棒套可以多次使用,提高了耗材的效率,成本降低30%以上。
2018.09.29
一种利用结构特异性核酸内切酶的基因克隆方法
本发明公开了一种利用结构特异性核酸内切酶的基因克隆方法,利用结构特异性核酸内切酶Fen1,将载体与目标基因之间杂交退火形成的带flap结构的重组DNA分子的flap链切除,形成带缺口的DNA重组质粒,转化大肠杆菌后修复缺口形成完好的环状重组DNA分子,进行DNA克隆。通过上述方式,本发明的方法能够提高显著提高目标基因与载体间的重组效率,而且只需要一对载体与目标基因的PCR片段,大大方便了操作,提高了克隆效率,能应用于重组DNA的构建(基因克隆)、DNA定点突变等,也可用于需要进行DNA文库构建的精准医疗等领域。
2018.09.28
血液微量cfDNA文库的标签特异性接头、引物组和建库方法
本发明公开一种血液微量cfDNA文库的标签特异性接头、引物组和建库方法;其中,所述的标签特异性接头序列如SEQ ID NO.1~5所示。所述的内引物组序列如SEQ ID NO.6~7所示。还包括一种基于随机序列构建cfDNA标签特异性基因组文库的构建方法,所述的建库方法操作简便,在初步PCR中无需换管与纯化,避免了建库过程中cfDNA的耗损,大大提高了文库的连接效率;同时加入内引物的概念,降低了引物二聚体的长度,避免了初步PCR时长引物二聚体的干扰。在保证较高的文库构建质量的同时,能够极大地提高实验效率,降低实验成本。
2018.09.26
一种新型血小板RNA提取试剂盒
本发明涉及一种新型血小板RNA提取试剂盒,包括第一盒体、与所述第一盒体顶部侧棱铰接的第二盒体;所述第一盒体内设有将第一盒体分设为多个独立单元的隔板,所述第二盒体通过挡板分设为第一腔室和第二腔室,所述第一腔室内设有管架组件,所述第二腔室内设有抽盒组件。本发明提供了一种新型血小板RNA提取试剂盒,翻折式的设计优化试剂盒的空间,提高试剂盒使用效率;优化试剂配制过程,实验过程大多数步骤均可在试剂盒上完成,提高实验效率,节约时间。
2018.09.26
一种提取蜜环菌总DNA的试剂及其应用
本发明提供一种提取蜜环菌总DNA的试剂及其应用,可从50 mg左右其菌丝体和子实体样品中,经过破碎裂解、DNA吸附、漂洗、洗脱等步骤,快速高效的提取总DNA,针对新鲜的干样品,同样也可提取到适用于ITS鉴定等分子生物学实验的总DNA。进一步的实验证明,该方法也可以在灵芝、金针菇、香菇等食药用菌上应用。本方法单个样品提取时间缩短至15 min,且所提取的DNA完整性好、纯度高,可直接用于PCR、Real‑Time PCR、分子标记等下游分子生物学试验。
2018.09.20
一种提取牛樟芝总DNA的试剂及应用
本发明公开了一种提取牛樟芝总DNA的试剂及应用。包括柱平衡、样品裂解、DNA吸附、洗涤及DNA洗脱等步骤。该方法与传统DNA提取方法相比如CTAB法、SDS法、碱裂解法和常规试剂盒相比,具有样品用量少、高效省时、DNA样品纯度高、完整性好、操作简单等优点,且整个提取过程中不涉及氯仿、苯酚、β‑巯基乙醇等有毒试剂,保证了研究人员免于有毒试剂的伤害。实验结果表明,本发明适用于多种真菌总DNA的提取和PCR鉴定,且单个样品提取时间缩短至15 min,且所提取的DNA完整性好、纯度高,可直接用于PCR、Real‑Time PCR、分子标记等下游分子生物学试验。
2018.09.20
一种处理酵母核糖核酸母液的方法
本发明涉及一种处理酵母核糖核酸母液的方法,将核糖核酸沉降分离后的酵母核糖核酸母液通过加入生石灰调节pH值至中性附近,固液分离后得到的清液经纳滤膜浓缩,使核糖核酸富集达到沉降浓度进行二次沉降,提高核糖核酸产品总收率。该方法不仅回收了PO
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3‑
制成磷酸钙盐,还减少RNA损失,提高了产品得率,并且重复利用盐水,降低生产成本。该方法操作简单、节约成本、保护环境,并且适合大规模生产。
2018.09.19
一种电击转化暹罗芽孢杆菌的方法
本发明公开一种电击转化暹罗芽孢杆菌的方法,属于微生物基因工程技术领域。本发明对暹罗芽孢杆菌JFL15电击转化过程中感受态细胞的制备、质粒的浓度以及电击参数等因素进行了全面的优化,首次建立了一套简单、有效的暹罗芽孢杆菌遗传转化方法。本发明的暹罗芽孢杆菌遗传转化方法操作简单,转化率高,效果稳定,可高效转化用于CRISPR‑cas9基因敲除以及用于同源重组敲除载体的大片度质粒(>11kbp),不仅为暹罗芽孢杆菌的遗传改造奠定了良好基础,对加快其在工业生产中的应用具有重要意义,同时也为其它芽孢杆菌的遗传转化提供了重要参考。
2018.09.18
一种基因编辑T细胞及其用途
本发明涉及一种新型的通用型T细胞(包括CAR‑T和TCR‑T细胞)及其制备方法。在一些实施方式中,该通用T细胞通过CRISPR/Cas9基因编辑技术,同时高效、稳定地敲除了T细胞的TCR和/或HLA和/或PD‑1蛋白。本发明的通用型CAR‑T在体内、体外具有高效持续的杀伤靶细胞的作用。
2018.09.18
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