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一种尿苷二磷酸葡萄糖及尿苷二磷酸葡萄糖醛酸的生物合成方法

公开(公告)号:CN109371079A

申请日:2018.11.12

公开(公告)日:2019.02.22

分类号:C12P19/30(2006.01)I C12R1/19(2006.01)N

申请(专利权)人:安徽禾庚生物技术有限公司

申请日期:2018.11.12

本发明公开了一种尿苷二磷酸葡萄糖及尿苷二磷酸葡萄糖醛酸的生物合成方法。本发明以可溶淀粉为主要初始原料,将高温α‑葡聚糖磷酸化酶和高温糖‑1‑磷酸核苷酸化酶分别在大肠杆菌中重组表达,利用表达后的菌体高温全细胞催化合成尿苷二磷酸葡萄糖。在此基础上,将高温尿苷二磷酸葡萄糖脱氢酶在大肠杆菌中重组表达,偶联上述尿苷二磷酸葡萄糖的合成体系高温全细胞催化合成尿苷二磷酸葡萄糖醛酸,同时在尿苷二磷酸葡萄糖醛酸的合成体系中引入高温NADH氧化酶的全细胞催化体系,构成高温NAD+/NADH循环系统,以减少辅酶NAD+的使用。本发明利用高温全细胞催化的方式,成功避免合成过程中菌体各种代谢通路的干扰,减少纯化难度。