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一种莱茵衣藻细胞核高效转化外源基因的方法

公开(公告)号:CN109777822A

申请日:2019.03.21

公开(公告)日:2019.05.21

分类号:C12N15/79

申请(专利权)人:四川轻化工大学

申请日期:2019.03.21

本发明公开了一种莱茵衣藻细胞核高效转化外源基因的方法,该方法包含:采用限制性核酸内切酶进行质粒单酶切试验,以制备线性质粒;其中,限制性核酸内切酶包含:BamH Ⅰ、Xba Ⅰ、EcoR Ⅰ和Sac Ⅰ中的任意一种;采用玻璃珠法转化线性质粒:将对数中期的莱茵衣藻采用培养基重悬,加入3~5μg质粒和灭菌的玻璃珠,震荡24~26s后的衣藻转入新的培养基中,黑暗复苏;待复苏后,采用含14~16μg/mL博来霉素的培养基依次光照和黑暗培养,获得莱茵衣藻转化子。本发明的方法能够提高转化率,实现线性质粒整合进入核基因组中。