一种斑马鱼胚胎单细胞悬液的制备方法

本发明公开了一种斑马鱼胚胎单细胞悬液的制备方法，顺序进行如下步骤：(1)取斑马鱼胚胎，加入Pronase E的水溶液；(2)37℃孵育4～5min；(3)使用2mL一次性滴管轻轻吹吸胚胎使绒毛膜剥落，移入1.5mL无酶离心管中，并快速吸走Pronase E；(4)加入E3培养基洗涤，移除，反复3～5遍；(5)加入冰上预冷的分散酶；(6)37℃孵育2‑5min，孵育期间间歇震荡；(7)加入FBS终止消化；(8)将步骤(7)得到的悬液过70μm筛网，将滤液再过40μm筛网；(9)过筛后的悬液200～500×g离心3～5min；(10)取冰上预冷的含1％的BSA的HBSS重悬细胞；(11)200～500×g离心步骤(10)得到的悬液3～5min；(12)重复步骤(10)和(11)清洗一次；(13)取冰上预冷的IESC重悬细胞，即得。